应用背景
乳酸菌是一类能发酵利用糖类物质而产生大量乳酸的细菌,一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌,它是一类对人体有益的菌群。乳酸菌发酵能产生大量的有机酸、醇类及各种氨基酸等代谢物,具有抑制腐败菌、提高消化率、防癌等生理功效。乳酸菌是一类重要的工业菌株,具有降胆固醇、降血压、抗肿瘤和提高机体免疫等作用,被广泛应用于食品发酵,有着重要的经济价值。
乳酸菌的应用历史非常悠久,但真正科学的研究和利用是始于19世纪中叶。近年来,利用乳酸菌系统表达外源蛋白也已引起广泛关注,但由于乳酸菌属于革兰氏阳性菌,具有厚而致密的刚性细胞壁,致使乳酸菌内源蛋白、表达的非分泌性外源蛋白以及其他非分泌性代谢产物的提取效率极低。因此,研究乳酸菌破壁方法以提高乳酸菌蛋白以及各种代谢产物的获得率具有重要的意义和应用价值。我们需要根据细胞的结构和化学组成选择合适的破壁方法,采用微生物发酵提取技术,高压细胞破壁仪可以通过空化效应引起的冲击波和剪切力使细胞破碎,提取乳酸菌内源蛋白、表达的外源蛋白以及多种代谢产物。
1、种子液制备:将菌株接种于培养基中发酵培养
2、发酵:将种子液接种于发酵罐中,厌氧发酵
3、均质破壁:将发酵好的乳酸菌发酵液通过高压均质机,均质破壁,得到破壁液
4、离心:将均质好的破壁液,通过离心机,得到离心后的破壁上清液
5、过滤:将离心后的破壁上清液过滤
高压细胞破碎仪是生物工程中一种重要的实验、生产设备,能够快速、高效地将细胞破碎并释放其胞内物质。高压细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构,均质、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反应等功能,故广泛应用于生物工程、基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程、微生物工程、生物化学、表面化学、药物化学、生物医药、生物制品等等实验室研究或企业生产。高压细胞破碎仪是胞内物质(蛋白质、酶、核酸、DNA/RNA)的提取和均质主要的样品制备手段,可用于蛋白质研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic(原核)、eurkaryotic细胞等,是生物工程及生物制药等行业研发及生产的标准设备。