应用背景
枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。B.subtilis属革兰氏阳性菌,无荚膜,周生鞭毛,能运动,需氧型,细胞壁仅含肽聚糖和磷壁质。芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,表面色暗,有皱褶状。广泛分布于土壤、空气和腐败有机物上,易在枯草浸汁中繁殖,应用领域广。
枯草芽孢杆菌广泛应用于淀粉酶、蛋白酶等多种工业蛋白质的表达和维生素、核苷等重要化学品的生产中,是重要的工业蛋白生产宿主生产各种工业用酶,特别是α-淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶、脂肪酶和β-葡聚糖酶等蛋白。它表达的外源蛋白有耐热性酶制剂 如耐高温a-淀粉酶等淀粉加工酶系;多肽类药物 如白细胞介素、人表皮生长因子(hEGF)、胰岛素原等;杀虫蛋白 如Bt蛋白、蛋白酶抑制剂、植物凝集素等。
通过菌种转基因的方式表达蛋白或核酸等物质,然后经过破壁后提取细胞内酶、蛋白质等活性的产物是生物工程中的重要技术。首先富集菌体,收集胞内产物的细胞或菌体。然后进行细胞重悬,用适当的缓冲液或培养液将离心或沉降等方法得到的固体(沉淀、细胞、活性物质等等)重新悬浮。其次进行细胞破碎,使产物转移到液相中。最后收集含生化物质的液相,进行碎片分离,分离除去细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和絮凝体等固体悬浮物,得到上清液或滤液。然后从澄清的滤液中提取胞内产物,从细胞裂解物中获取目标产物。
高压细胞破碎仪是生物工程中一种重要的实验、生产设备,能够快速、高效地将细胞破碎并释放其胞内物质。高压细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构,均质、乳化、混合、消泡、分散、提取、加速反应等功能,故广泛应用于生物工程、基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程、微生物工程、生物化学、表面化学、药物化学、生物医药、生物制品等等实验室研究或企业生产。高压细胞破碎仪是胞内物质(蛋白质、酶、核酸、DNA/RNA)的提取和均质主要的样品制备手段,可用于蛋白质研究、核酸萃取、破碎不同prokaryotic(原核)、eurkaryotic细胞等,是生物工程及生物制药等行业研发及生产的标准设备。